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毛細(xì)管電泳儀工作原理
毛細(xì)管電泳是一種以彈性石英毛細(xì)管為分離通道,以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力,根據(jù)樣品中各組分遷移率和分布行為的差異,實(shí)現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。
使用的設(shè)備
電源:有0~30kV可調(diào)電壓和穩(wěn)壓電源,內(nèi)徑小于100μm(常用50~75μm),長(zhǎng)度一般為30~100cm彈性石英毛細(xì)管、電極槽、檢測(cè)器和取樣裝置。
檢測(cè)器有:紫外、可見(jiàn)光譜檢測(cè)器、激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器和電化學(xué)檢測(cè)器,其中z常用的是紫外檢測(cè)器。
取樣方法有:電動(dòng)法(電遷移)、壓力法(正壓、負(fù)壓)和虹吸法。
整套儀器還配備了自動(dòng)沖洗、自動(dòng)取樣、溫度控制、數(shù)據(jù)采集和處理等部件。
毛細(xì)管電泳產(chǎn)生的電泳原理:
用于毛細(xì)管電泳的石英毛細(xì)管柱,當(dāng)pH值大于3時(shí),內(nèi)表面帶負(fù)電,與緩沖液接觸形成雙電層。形成雙電層一側(cè)的緩沖液帶正電,向負(fù)極移動(dòng),形成電滲流。同時(shí),在緩沖溶液中,在電場(chǎng)的作用下,帶電粒子以不同的速度向與帶電極性相反的方向運(yùn)動(dòng),形成電泳。帶電粒子在毛細(xì)管緩沖液中的遷移速度等于電泳流和電滲流的矢量和。各種粒子由于所攜帶的電荷量、質(zhì)量、體積、形狀等因素造成的遷移速度不同而被分離。